守门人突变
守门人突变（Gatekeeper Mutation）是指发生在 蛋白激酶（Protein Kinase）ATP 结合口袋（ATP-binding Pocket）入口处关键 氨基酸 残基上的点突变。该位点因控制着口袋内部空间的准入而被形象地称为“守门人”。在 癌症 治疗中，该位点的氨基酸由较小的分子（如 苏氨酸 / Threonine）替换为体积较大的分子（如 甲硫氨酸 / Methionine 或 异亮氨酸 / Isoleucine），通过 空间位阻（Steric Hindrance）效应阻碍 酪氨酸激酶抑制剂（TKI）的结合，从而导致强烈的 获得性耐药（Acquired Resistance）。典型的例子包括 EGFR 的 T790M 和 BCR-ABL1 的 T315I。
分子机制：空间与能量的双重博弈
守门人突变 通过改变 激酶 的 疏水性 口袋特征，从物理和化学两个维度重塑了药效学：
- 空间位阻 (Steric Blockade)： 守门人位置通常由 苏氨酸 占据，其侧链较小。当突变为 甲硫氨酸 或 异亮氨酸 后，庞大的侧链像一扇门一样挡住了药物分子的 构象 伸入，导致药物无法与激酶核心区域形成稳定的 氢键。
- ATP 亲和力上调： 以 EGFR T790M 为例，该突变显著提高了激酶对内源性 ATP 的结合 亲和力（降低了 $K_m$ 值）。由于第一代 TKI 是 ATP 竞争性 抑制剂，亲和力的改变使 ATP 在竞争中获胜，从而恢复了 致癌信号 的传导。
- 激酶催化构象稳定： 突变往往有助于激酶维持在“激活态”构象，进一步降低了药物结合的可能性。
临床矩阵：核心驱动基因中的守门人位点对比
| 受累基因 | 守门人突变位点 | 耐药药物 | 针对性克服药物 |
|---|---|---|---|
| EGFR (肺癌) | T790M | 吉非替尼, 厄洛替尼 | 奥希替尼, 阿美替尼 |
| BCR-ABL1 (CML) | T315I | 伊马替尼, 尼洛替尼 | 奥雷巴替尼, 普纳替尼 |
| ALK (肺癌) | L1196M | 克唑替尼 | 阿来替尼, 劳拉替尼 |
| KIT (GIST) | T670I | 伊马替尼, 舒尼替尼 | 瑞派替尼, 瑞格非尼 |
应对策略：攻克物理屏障的创新方案
- 不可逆共价结合： 第三代 EGFR-TKI（如 奥希替尼）通过绕过守门人位点，直接与激酶口袋边缘的 Cys797 形成 共价键。即使守门人突变存在，药物仍能紧紧锁定靶点。
- 分子构象优化： 像 奥雷巴替尼 这类药物采用了独特的 炔基 桥接结构，使其能够“跨越” T315I 突变带来的空间障碍。
- 变构抑制剂 (Allosteric Inhibitors)： 结合在非 ATP 竞争位点的药物（如 阿斯米尼布 / Asciminib）完全不受 ATP 结合口袋 内 守门人突变 的影响，开辟了全新的耐药治疗路径。
关键相关概念
学术参考文献与权威点评
[1] Gorre ME, et al. (2001). BCR-ABL point mutants isolated from patients with imatinib mesylate-resistant CML. Science. 2001;293(5531):876-80.
[学术点评]：该项具有奠基性的研究首次鉴定了 T315I 作为 CML 对 伊马替尼 耐药的关键开关。
[2] Yun CH, et al. (2008). The T790M "gatekeeper" mutation of the EGFR kinase stabilizes the active conformation. Proceedings of the National Academy of Sciences (PNAS).
[学术点评]：[Academic Review] 级文献。详细解释了 T790M 突变如何通过稳定 ATP 亲和力而非仅仅依靠 位阻 来实现耐药。