Tyrphostin AG 1296
Tyrphostin AG 1296（简称 AG 1296）是一种强效且具有高度选择性的血小板衍生生长因子受体（PDGFR）酪氨酸激酶抑制剂。作为 **Tyrphostin**（酪氨酸磷酸化抑制剂）家族的代表成员，AG 1296 通过竞争性结合激酶域的 ATP 位点，显著抑制 PDGFR-α 和 PDGFR-β 的自磷酸化过程。在分子生物学研究中，它被广泛用于解析 Ras/MAPK 及 PI3K/Akt 等下游通路在细胞增殖、迁移及纤维化疾病中的作用。此外，AG 1296 亦表现出对 c-Kit 和 FLT3 激酶的抑制活性，使其在白血病及神经胶质瘤的体外模型研究中具有重要价值。
分子机制：竞争性拮抗与信号阻断
AG 1296 的生物学活性核心源于其对受体酪氨酸激酶（RTK）催化功能的精准干预：
- ATP 竞争机制： AG 1296 分子模拟 ATP 的嘌呤环结构，竞争性结合 PDGFR 胞内激酶结构域的 ATP 结合口袋，从而阻断磷酸基团向靶蛋白转移。
- 选择性图谱： 在微摩尔级浓度下，它能选择性抑制 PDGFR，而对 EGFR、Insulin Receptor 或 FGFR 的抑制作用极弱。这种高选择性使其成为区分生长因子通路的理想工具。
- 抑制细胞周期： 通过阻断 PDGF 诱导的信号上行，AG 1296 可诱导细胞停滞于 G1 期，减少 Cyclin D1 的表达，并最终引发对生长因子依赖型细胞的凋亡。
- c-Kit 与 FLT3 交叉抑制： 它是 c-Kit 突变体的有效抑制剂，在研究 肥大细胞 增多症及某些急性髓系白血病（AML）模型中具有显著活性。
研究景观：AG 1296 的实验数据矩阵
| 实验模型 | 观察效应 | 科学价值 |
|---|---|---|
| Swiss 3T3 成纤维细胞 | 完全抑制 PDGF-BB 诱导的 DNA 合成。 | 确立了 PDGFR 是驱动成纤维细胞有丝分裂的关键受体。 |
| 胶质母细胞瘤细胞系 | 下调 Akt 磷酸化，诱导细胞凋亡。 | 验证了 PDGFR 旁分泌环路在脑肿瘤维持中的重要性。 |
| FLT3-ITD 突变模型 | 表现出强效的激酶抑制活性。 | 为开发新一代针对 AML 的 FLT3 抑制剂 提供了结构参考。 |
实验应用策略：操作规范与稳定性
- 溶液配制： 建议在无水 DMSO 中配制 10-50 mM 的母液。由于 AG 1296 对光敏感，配制过程及储存需严格 避光。
- 储存条件： 母液应分装保存在 -20℃ 或 -80℃，避免反复冻融导致喹喔啉环降解。
- 给药时间窗口： 在细胞实验中，通常在加入生长因子（如 PDGF）前 30-60 分钟预处理细胞，以确保激酶活性完全被封闭。
- 实验对照： 建议使用 AG 1478（EGFR 抑制剂）作为平行对照，以确证所观察到的效应是否具有 RTK 亚型特异性。
关键相关概念
学术参考文献与权威点评
[1] Kovalenko M, et al. (1994). Selective platelet-derived growth factor receptor kinase blockers and their effects in cell biology. Cancer Research. 54(23):6106-14.
[学术回顾]：该研究首次系统报道了 AG 1296 的选择性特征，确立了其作为 PDGFR 抑制剂的标准工具地位。
[2] Levitzki A, Gazit A. (1995). Tyrosine kinase inhibition: an approach to drug development. Science. 267(5205):1782-8.
[学术点评]：揭示了 Tyrphostin 类分子通过模拟 ATP 结合模式实现激酶抑制的化学设计哲学。