免疫组化 (IHC)
免疫组化 (Immunohistochemistry, IHC) 是一种利用 抗原抗体反应 的特异性，在组织原位通过化学反应使标记抗体的显色剂（如酶或荧光素）显色，从而对抗原进行定性、定位和定量研究的技术。在病理学中，IHC 是癌症诊断的“金标准”工具之一，能够通过检测细胞表面或胞内特定蛋白（如 dMMR 修复蛋白、HER2、PD-L1 等）的表达缺失或增强，为临床提供精准的分型依据和用药指导。
实验步骤：从组织到可视信号
IHC 是一项高度程序化的技术，每一个步骤都直接影响显色的真实性与准确性：
- 抗原修复 (Antigen Retrieval)： 组织固定过程会导致抗原决定簇（Epitopes）被遮盖，通过热诱导或酶处理重新暴露抗原位点。
- 抗体孵育： 一抗特异性结合目标蛋白；二抗（通常标记有 HRP 酶）结合一抗，实现信号放大。
- 显色与复染： 加入 DAB 底物，在酶催化下产生棕色沉淀。最后使用苏木素复染细胞核（呈蓝色），形成色彩鲜明的空间对比。
- 病理判读： 病理医师根据着色强度（Intensity）和着色比例（Percentage）给出 H-score 评分。
IHC 在 dMMR 判读中的应用
在筛查 林奇综合征 或评估 MSI 状态时，IHC 检测 4 项错配修复蛋白（MLH1, MSH2, MSH6, PMS2）的缺失情况具有极高的临床价值。
| 染色表现 | 生化解释 | 临床结论 |
|---|---|---|
| 四项全部阳性 (+) | 修复蛋白表达正常。 | pMMR (修复完整)；通常对应 MSS。 |
| 任意一项缺失 (-) | 对应基因突变或启动子甲基化。 | dMMR (修复缺陷)；预示 MSI-H。 |
权威参考文献与专家点评
学术参考文献 [Academic Review]
[1] Wolff, A. C., et al. (2018). HER2 testing in breast cancer: American Society of Clinical Oncology/College of American Pathologists clinical practice guideline focus update. Journal of Clinical Oncology, 36(20), 2105-2122.
[专家点评]：详细规定了 IHC 在 HER2 判定中的标准操作规范及结果分类依据。
[2] Dabbs, D. J. (2021). Diagnostic Immunohistochemistry: Theranostic and Genomic Applications. Elsevier.
[专家点评]：该领域的权威教科书，系统阐述了 IHC 从基础诊断到指导基因药物治疗的全面应用。
关键相关概念
- dMMR： 通过 IHC 检测到的 MMR 蛋白表达缺失。
- PD-L1 TPS/CPS： IHC 判读中的两种评分系统，决定 PD-1 药物的起用标准。
- 原位杂交 (ISH)： 常作为 IHC 的补充，用于检测基因扩增（如 HER2 的 FISH 检测）。