DROSHA
DROSHA（Ribonuclease III），全称为 Drosha 核糖核酸酶 III，是真核生物 microRNA (miRNA) 生物合成途径中的起始酶。作为一种核内 RNase III 家族成员，DROSHA 与其核心辅因子 DGCR8（DiGeorge Syndrome Critical Region 8）共同组装成名为“微处理器” (Microprocessor) 的巨型蛋白复合物。该复合物负责在细胞核内精确识别并切割初级 miRNA 转录本 (pri-miRNA)，将其加工成发夹状的前体 miRNA (pre-miRNA)。DROSHA 的功能异常会导致全球性 miRNA 表达谱失调，在临床上与多种恶性肿瘤（特别是肾母细胞瘤）的发生密切相关。
分子机制：微处理器的“分子尺”
DROSHA 在细胞核中执行其功能，它是 miRNA 生成过程的“看门人”。
- 复合物组装 (The Microprocessor)：
DROSHA 自身缺乏对 RNA 底物的精确识别能力，必须结合辅因子 DGCR8。DGCR8 通过其 RNA 结合域识别 pri-miRNA 的 ssRNA-dsRNA 交界处，作为“分子尺”辅助 DROSHA 定位切割位点。 - 双催化中心切割 (Dual Catalytic Center Cleavage)：
DROSHA 拥有两个串联的 RNase III 结构域 (RIIIDa 和 RIIIDb)。这两个结构域形成一个分子内二聚体，分别切割 RNA 发夹结构的 3' 臂和 5' 臂。这种交错切割产生具有 2nt 3' 突出端的 pre-miRNA，这是后续被 Exportin-5 识别并转运出核的关键特征。
Microprocessor 切割 pri-miRNA 的机制
临床警示：肾母细胞瘤的关键驱动者
突变热点与 miRNA 缺陷
DROSHA 突变在儿童肾母细胞瘤 (Wilms Tumor) 中高度富集，约 12% 的病例携带该基因突变。
金属离子结合位点突变：
最常见的体细胞突变发生在 RNase IIIb 结构域中保守的金属离子结合残基（如 E1147K）。这种突变是一个显性负效应突变 (Dominant-negative)，它破坏了 DROSHA 结合 Mg2+ 的能力，导致酶活性丧失。
后果： miRNA 生物合成的广泛受阻，特别是肿瘤抑制性 miRNA（如 let-7家族）的表达下调。这导致癌基因（如 MYCN, IGF2）过表达，驱动未分化肾元前体细胞的恶性转化。
| 疾病类型 | 变异形式 | 临床效应 / 机制 |
|---|---|---|
| 肾母细胞瘤 | 错义突变 (E1147K 等) | RNase IIIb 结构域失活，导致全局性 miRNA 生成受损，驱动肿瘤发生。 |
| 乳腺癌 | 表达下调 / 拷贝数丢失 | DROSHA 低表达与肿瘤侵袭性增加、预后不良及转移风险升高相关。 |
| 肺癌 | 表达水平异常 | DROSHA 表达水平可作为预后标志物，低表达通常预示生存期缩短。 |
治疗策略与前景
目前尚无直接靶向 DROSHA 酶活性的临床药物，但针对 DROSHA 功能缺失导致的 miRNA 缺陷是研究热点。
- miRNA 替代疗法 (miRNA Replacement)：
对于 DROSHA 突变的肿瘤，通过导入合成的 miRNA mimics（如 let-7 模拟物）来恢复抑癌功能，绕过上游的加工缺陷。 - 非经典功能靶向：
DROSHA 还具有不依赖 miRNA 的功能（如维持基因组稳定性、抗病毒防御）。研究其在 DNA 损伤反应中的角色可能提供新的合成致死靶点。
学术参考文献与权威点评
[1] Lee Y, Ahn C, Han J, et al. (2003). The nuclear RNase III Drosha initiates microRNA processing. Nature. 2003;425(6956):415-419.
[学术点评]：发现之源。Kim 实验室的开创性工作，首次鉴定 DROSHA 为初级 miRNA 的核心加工酶，定义了 miRNA 生物合成的核内步骤。
[2] Walz AL, Ooms A, Gadd S, et al. (2015). Recurrent DGCR8, DROSHA, and SIX homeodomain mutations in favorable histology Wilms tumors. Cancer Cell. 2015;27(2):286-297.
[学术点评]：临床突破。利用全基因组测序在肾母细胞瘤中发现了复发性的 DROSHA 和 DGCR8 热点突变，揭示了 miRNA 加工缺陷在该肿瘤发生中的驱动作用。
[3] Han J, Lee Y, Yeom KH, et al. (2004). The Drosha-DGCR8 complex in primary microRNA processing. Genes & Development. 2004;18(24):3016-3027.
[学术点评]：机制解析。阐明了 Microprocessor 复合物的构成，确立了 DGCR8 作为分子尺辅助 DROSHA 精确切割底物的分子机制。
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