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限制性核酸内切酶 - 版本历史
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112.247.67.26：以“一般是以微生物属名的第一个字母和种名的前两个字母组成，第四个字母表示菌株(品系)。例如，从Bacillus amylolique facien...”为内容创建页面
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<p>以“一般是以微生物属名的第一个字母和<a href="/%E7%A7%8D%E5%90%8D" title="种名">种名</a>的前两个字母组成，第四个字母表示<a href="/%E8%8F%8C%E6%A0%AA" title="菌株">菌株</a>(品系)。例如，从Bacillus amylolique facien...”为内容创建页面</p>
<p><b>新页面</b></p><div>一般是以微生物属名的第一个字母和[[种名]]的前两个字母组成，第四个字母表示[[菌株]](品系)。例如，从Bacillus amylolique faciens H中提取的限制性内切酶称为Bam H，在同一品系[[细菌]]中得到的识别不同[[碱基顺序]]的几种不同特异性的酶，可以编成不同的号，如HindII、HindIII，HpaI、HpaII，MboI、MboI等。 限制性内切酶（restriction endonuclease）:一种在特殊核甘酸序列处水解双链DNA的[[内切酶]]。Ⅰ型限制性内切酶既能[[催化]][[宿主]]DNA的[[甲基化]]，又催化非甲基化的DNA的水解；而Ⅱ型限制性内切酶只催化非甲基化的DNA的水解。<br />
<br />
别名 Endodeoxyribonuclease简称[[限制酶]]<br />
<br />
[[酶反应]] 限制性内切酶能分裂DNA[[分子]]在一限定数目的专一部位上。它能识别外源DNA并将其降解。<br />
<br />
单位定义 在指明pH与37℃，在0.05mL反应混合物中，1小时[[消化]]1μg的λDNA的酶量为1单位。<br />
<br />
性状制品不含非专一的[[核酸]][[水解酶]](由10单位内切酶与1μg λDNA，保温16小时所得的[[凝胶电泳]]图谱的稳定性表示)。 <br />
==限制酶的分布==<br />
[[限制性核酸内切酶]]分布极广，几乎在所有细菌的属、种中都发现至少一种限制性内切酶，多者在一属中就有几十种，例如在嗜血杆菌属中(Haemophilus)现已发现的就有22种。有的菌株含酶量极低，很难分离定性；然而在有的菌株中，酶含量极高．如E. coli的pMB4(EcoRI酶)和H. aegyptius(Hal III酶)就是高产酶菌株。据报道从10g的H. aegyptius的[[细胞]]中，能分离提纯出可消化l0gλ噬茵体DNA的酶量。到目前为止，细菌是限制性内切酶，尤其是特异性非常强的I类限制性内切酶的主要来源。 <br />
== 限制性内切酶的分类和性质==<br />
根据酶的功能特性、大小及[[反应时]]所需的辅助因子，限制性内切酶可分为两大类，即I类酶和II酶。最早从[[大肠杆菌]]中发现的EcoK、EcoB就属于I类酶。其分子量较大；反应过程中除需Mg2+外，还需要S-[[腺苷]]-L[[甲硫氨酸]]、ATP；在DNA分子上没有特异性的酶解片断，这是I、II类酶之间最明显的差异。因此，I类酶作为DNA的分析工具价值不大。II类酶有EcoR I、BamH I、Hind II、Hind III等。其分子量小于105道尔顿；反应只需Mg2+；最重要的是在所识别的特定碱基顺序上有特异性的切点，因而DNA分子经过II类酶作用后，可产生特异性的酶解片断，这些片断可用凝胶电泳法进行分离、鉴别。<br />
<br />
限制性内切酶识别DNA序列中的[[回文序列]]。有些酶的切割[[位点]]在回文的一侧(如EcoR I、BamH I、Hind等)，因而可形成[[粘性末端]]，另一些II类酶如Alu I、BsuR I、Bal I、Hal III、HPa I、Sma I等，切割位点在回文序列中间，形成[[平整末端]]。Alu I的切割位点如下：<br />
<br />
5'-A G^C T-3' <br />
<br />
3'-T C^G A-5'<br />
<br />
在已发现的限制性内切酶中，近百种酶的识别顺序已被测定。有很多来源不同的酶有相同的[[碱基]]识别顺序，这种酶称为“[[异源]]同功酶”(isochizomer，同切限制内切酶；[[同裂酶]])。应该注意的是，这些酶虽然有相同的识别顺序，但它们的切点并不完全一样。例如Xma I和Sma I都识别六[[核苷酸]]CCCGGG，但Xma I的切点在cCCGGG，而Ema I的切点则在CCCGgGG，前者切割DNA分子，形成带有CCGG粘性末端的DNA片段，而后者并不形成粘性末端。当然，也有识别顺序和切点都相同的酶，如Hap II、Hpa II、Mno I，都在识别顺序CCGG内有一相同的切点，Hal III和BsuR I同样在识别顺序GGCC内有一相同的切点。 <br />
==用途==<br />
用于DNA[[基因组]][[物理图谱]]的组建；[[基因]]的定位和基因分离；DNA分子[[碱基序列分析]]；比较相关的DNA分子和[[遗传工程]]。 <br />
==命名==<br />
限制酶的命名是根据细菌种类而定，以EcoRI为例：<br />
<br />
<table><tr><td><i>E</i></td><td><i>Escherichia</i></td><td>(属)</td></tr><tr><td><i>co</i></td><td><i>coli</i></td><td>(种)</td></tr><tr><td>R</td><td>RY13</td><td>(品系)</td></tr><tr><td>I</td><td>首先发现</td><td>在此类细菌中发现的顺序</td></tr></table> <br />
==类型==<br />
根据限制酶的结构,[[辅因子]]的需求切位与作用方式，可将限制酶分为三种类型，分别是第一型（Type I）、第二型（Type II）及第三型（Type III）。 <br />
===第一型限制酶===<br />
同时具有修饰(modification)及认知切割(restriction)的作用；另有认知(recognize)DNA上特定碱基序列的能力，通常其切割位(cleavage site)距离认知位(recognition site)可达数千个碱基之远。例如：<i>Eco</i>B、<i>Eco</i>K。 <br />
===第二型限制酶===<br />
只具有认知切割的作用，修饰作用由其他酵素进行。所认知的位置多为短的回文序列(palindrome sequence)；所剪切的碱基序列通常即为所认知的序列。是遗传工程上，实用性较高的限制酶种类。例如：<i>Eco</i>RI、<i>Hind</i>III。 <br />
===第三型限制酶===<br />
与第一型限制酶类似，同时具有修饰及认知切割的作用。可认知短的不对称序列，切割位与认知序列约距24-26个[[碱基对]]。例如：<i>Eco</i>PI、<i>Hinf</i>III。<br />
<br />
[[分类:生物化学]][[分类:酶]][[分类:生物学]][[分类:分子生物学]]<br />
==参看==<br />
*[[医学遗传学/限制性核酸内切酶|《医学遗传学基础》- 限制性核酸内切酶]]</div>
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