https://www.yiliao.com/index.php?action=history&feed=atom&title=%E8%A1%A8%E8%BE%BE%E5%BA%8F%E5%88%97%E6%A0%87%E7%AD%BE 2026-04-22T11:17:37Z 本wiki的该页面的版本历史 MediaWiki 1.35.1 https://www.yiliao.com/index.php?title=%E8%A1%A8%E8%BE%BE%E5%BA%8F%E5%88%97%E6%A0%87%E7%AD%BE&diff=197045&oldid=prev 2014-02-06T10:41:03Z

<p>以“EST(Expressed Sequence Tag)<a href="/%E8%A1%A8%E8%BE%BE%E5%BA%8F%E5%88%97%E6%A0%87%E7%AD%BE" title="表达序列标签">表达序列标签</a> 原理： EST是从一个随机选择的cDNA 克隆进行5’端和3’端单一次测序获得的短的cDNA 部...”为内容创建页面</p> <p><b>新页面</b></p><div>EST(Expressed Sequence Tag)[[表达序列标签]]<br /> <br /> 原理：<br /> <br /> EST是从一个随机选择的cDNA 克隆进行5’端和3’端单一次测序获得的短的cDNA 部分序列,代表一个完整[[基因]]的一小部分,在数据库中其长度一般从20 到7000bp 不等,平均长度为360 ±120bp 。EST 来源于一定环境下一个组织总mRNA 所构建的cDNA 文库,因此EST也能说明该组织中各基因的表达水平。<br /> <br /> 技术路线：<br /> <br /> 首先从样品组织中提取mRNA ,在[[逆转录酶]]的作用下用oligo ( dT) 作为[[引物]]进行RT -PCR 合成cDNA ,再选择合适的载体构建cDNA 文库,对各[[菌株]]加以整理,将每一个菌株的[[插入片段]]根据载体多克隆[[位点]]设计引物进行两端一次性自动化测序,这就是EST 序列的产生过程。<br /> <br /> 应用：<br /> <br /> EST作为表达基因所在区域的[[分子]]标签因编码DNA 序列高度保守而具有自身的特殊性质,与来自非表达序列的标记(如AFLP、RAPD、SSR 等) 相比更可能穿越家系与种的限制,因此EST标记在[[亲缘关系]]较远的[[物种]]间比较[[基因组]][[连锁图]]和比较[[质量性状]]信息是特别有用。同样,对于一个DNA 序列缺乏的目标物种,来源于其他物种的EST也能用于该物种有益基因的遗传作图,加速物种间相关信息的迅速转化。具体说,EST的作用表现在: (1) 用于构建基因组的[[遗传图谱]]与[[物理图谱]]; (2) 作为[[探针]]用于[[放射性]]杂交; (3) 用于定位克隆; (4) 借以寻找新的基因; (5) 作为分子标记; (6) 用于研究生物群体[[多态性]]; (7) 用于研究基因的功能; (8) 有助于药物的开发、品种的改良; (9) 促进基因芯片的发展等方面。正是因为EST 表现出了这些巨大潜能,使其得到了充分的利用与发展。<br /> <br /> 在人类基因组研究中，有一个区别于“全基因组战略”的“cDNA战略”，既只测定[[转录]]的DNA序列，也就是测定基因[[转录产物]]mRNA[[反转录]]产生的互补DNA---cDNA.cDNA代表了基因中编码[[蛋白质]]的序列。EST则是cDNA的一个片段，一般长200-400个[[核苷酸]]对。一个全长的cDNA分子可以有许多个EST，但特定的EST有时可以代表某个特定的cDNA分子。两端有重叠的[[共有序列]]的EST可以组装成一个叠连群(contig),直到装配成全长的cDNA序列，这样就等于是克隆了一个基因的[[编码序列]]。将EST定位在基因组，也可作为基因组作图时的一种标记序列。<br /> <br /> [[分类:生物]][[分类:生命科学]][[分类:生物工程]]</div>

112.247.67.26