https://www.yiliao.com/index.php?action=history&feed=atom&title=%E7%94%9F%E7%89%A9%E5%8C%96%E5%AD%A6%E4%B8%8E%E5%88%86%E5%AD%90%E7%94%9F%E7%89%A9%E5%AD%A6%2FDNA%E5%A4%8D%E5%88%B6%E7%9A%84%E6%96%B9%E5%BC%8F%E5%8F%8A%E4%B8%80%E8%88%AC%E8%BF%87%E7%A8%8B 2026-04-27T22:55:20Z 本wiki的该页面的版本历史 MediaWiki 1.35.1 https://www.yiliao.com/index.php?title=%E7%94%9F%E7%89%A9%E5%8C%96%E5%AD%A6%E4%B8%8E%E5%88%86%E5%AD%90%E7%94%9F%E7%89%A9%E5%AD%A6/DNA%E5%A4%8D%E5%88%B6%E7%9A%84%E6%96%B9%E5%BC%8F%E5%8F%8A%E4%B8%80%E8%88%AC%E8%BF%87%E7%A8%8B&diff=176174&oldid=prev 2014-02-06T05:23:55Z

<p>以“{{Hierarchy header}} ===(一)<a href="/DNA" title="DNA">DNA</a>的<a href="/%E5%8D%8A%E4%BF%9D%E7%95%99%E5%A4%8D%E5%88%B6" title="半保留复制">半保留复制</a>(semiconservative replication)=== Watson和Crick在提出DNA双<a href="/%E8%9E%BA%E6%97%8B%E7%BB%93%E6%9E%84" title="螺旋结构">螺旋结构</a>模型时即推测，DNA在...”为内容创建页面</p> <p><b>新页面</b></p><div>{{Hierarchy header}}<br /> ===(一)[[DNA]]的[[半保留复制]](semiconservative replication)===<br /> <br /> Watson和Crick在提出DNA双[[螺旋结构]]模型时即推测，DNA在复制时首先两条链之间的氢键断裂两条链分开，然后以每一条链分别做模板各自合成一条新的DNA链，这样新合成的[[子代]]DNA[[分子]]中一条链来自[[亲代]]DNA，另一条链是新合成的，这种复制方式为半保留复制。<br /> <br /> 1958年Meselson和Stahl利用氮标记技术在[[大肠杆菌]]中首次证实了DNA的半保留复制，他们将大肠杆菌放在含有15N标记的NH4Cl[[培养基]]中繁殖了15代，使所有的大肠杆菌DNA被15N所标记，可以得到15N桪NA。然后将[[细菌]]转移到含有14N标记的NH4Cl培养基中进行培养，在培养不同代数时，收集细菌，裂介[[细胞]]，用[[氯化铯]](CsCl)[[密度梯度离心]]法观察DNA所处的位置。由于15N桪NA的密度比普通DNA(14N-DNA)的密度大，在氯化铯密度梯度离心(density gradientcentrifugation)时，两种密度不同的DNA分布在不同的区带。<br /> <br /> 实验结果表明：在全部由15N标记的培养基中得到的15N桪NA显示为一条重密度带位于[[离心管]]的管底。当转入14N标记的培养基中繁殖后第一代，得到了一条中密度带，这是15N桪NA和14N-DNA的杂交分子。第二代有中密度带及低密度带两个区带，这表明它们分别为15N14N-DNA和14N14N-DNA。随着以后在14N培养基中培养代数的增加，低密度带增强，而中密度带逐渐减弱，离心结束后，从管底到管口，CsCl溶液密度分布从高到低形成密度梯度，不同重量的DNA分子就停留在与其相当的CsCl密度处，在紫外光下可以看到DNA分子形成的区带。为了证实第一代杂交分子确实是一半15N-DNA－半14N-DNA，将这种杂交分子经加热变性，对于变性前后的DNA分别进行CsCl密度梯度离心，结果变性前的杂交分子为一条中密度带，变性后则分为两条区带，即重密度带(15N-DNA)及低密度带(14N-DNA)。它们的实验只有用半保留复制的理论才能得到圆满的解释(图16－2和16-3)。<br /> <br /> {| class=&quot;wikitable&quot;<br /> |<br /> {{图片|gracl6h0.jpg|}}<br /> |<br /> {{图片|gracl9oa.jpg|}}<br /> |-<br /> | 图16-2　DNA的半保留复制第一代分子含有一条亲代的链(用[[黑色素]]示)，与另一条新合成的链(用白色表示)配对。在以后的连续复制过程中，原来亲代的两条链仍然保持完整，因此总有两个分子各具有一条原来亲代的链。<br /> | 图16-3　DNA的半保留复制－MeslsonStahl实验密度梯度离心后的DNA位置：左[[三管]]为对照；右三管为实验结果<br /> |}<br /> <br /> ===(二)DNA复制的一般过程：===<br /> <br /> DNA双螺旋是由两条方向相反的[[单链]]组成，复制开始时，双链打开，形成一个[[复制叉]](replicative fork,从打开的起点向一个方向形成)或一个复制泡(replicative bubble，从打开的起点向两个方向形成。)两条单链分别做模板。各自合成一条新的DNA链。由于DNA一条链的走向是5′→3′方向，另一条链的走向是3′→5′方向，但生物体内DNA[[聚合酶]]只能[[催化]]DNA从5′→3′的方向合成。那么，两条方向不同的链怎样才能做模板呢?这个问题由日本学者岗崎先生解决。<br /> <br /> 原来，在以3′→5′方向的母链为模板时，复制合成出一条5′→3′方向的[[前导链]](leadingstrand)，前导链的前进方向与复制叉打开方向是一致的，因此前导链的合成是连续进行的，而另一条母链DNA是5′→3′方向，它作为模板时，复制合成许多条5′→3′方向的短链，叫做随从链(lagging strand)，随从链的前进方向是与复制叉的打开方向相反的。随从链只能先以片段的形式合成，这些片段就叫做岗崎片段(Okazaki fragments)，[[原核生物]]岗崎片段含有1000-2000[[核苷酸]]，[[真核生物]]一般100?00核苷酸。最后再将多个岗崎片段连接成一条完整的链。由于前导链的合成是连续进行的，而随从链的合成是不连续进行的，所以从总体上看DNA的复制是半不连续复制(图16-4)。<br /> <br /> {{图片|graclcvq.jpg|DNA的半不连续复制}}<br /> <br /> 图16－4　DNA的半不连续复制<br /> <br /> DNA复制的全部过程可以人为地分成三个阶段，第一个阶段为DNA复制的起始阶段，这个阶段包括起始点，复制方向以及[[引发体]]的形成，第二阶段为DNA链的延长，包括前导链及随从链的形成和切除[[RNA]][[引物]]后填补空缺及连接岗崎片段。第三阶段为DNA复制的终止阶段。在DNA复制的整个过程中需要30多种酶及[[蛋白质]]分子参加，我们将在DNA复制的各个阶段中着重介绍它们的作用。<br /> {{Hierarchy footer}}<br /> {{生物化学与分子生物学图书专题}}</div>

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