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2014-02-06T05:28:20Z

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[[分子]][[生物学]]的发展大致可分为三个阶段。

== （一）准备和酝酿阶段==

19世纪后期到20世纪50年代初，是现代分子生物学诞生的准备和酝酿阶段。在这一阶段产生了两点对生命本质的认识上的重大突破。

确定了[[蛋白质]]是生命的主要物质基础。

19世纪末Buchner兄弟证明[[酵母]]无细胞提取液能使糖发酵产生[[酒精]]，第一次提出酶（enzyme）的名称，酶是[[生物催化剂]]。20世纪20-40年代提纯和结晶了一些酶（包括[[尿素酶]]、[[胃蛋白酶]]、[[胰蛋白酶]]、共同酶、[[细胞色素C]]、[[肌动蛋白]]等），证明酶的本质是蛋白质。随后陆续发现生命的许多基本现象（物质[[代谢]]、[[能量代谢]]、[[消化]]、[[呼吸]]、运动等）都与酶和蛋白质相联系，可以用提纯的酶或蛋白质在体外实验中重复出来。在此期间对蛋白质结构的认识也有较大的进步。1902年EmilFisher证明蛋白质结构是[[多肽]]；40年代末，Sanger创立[[二硝基氟苯]]（DNFB）法、Edman发展异硫氰酸苯酯法分析肽链N[[端氨基酸]]；1953年Sanger和Thompson完成了第一个肽分子——[[胰岛素]]A链和B链的[[氨基酸]]全序列分析。由于结晶X-线衍射分析技术的发展，1950年Pauling和Corey提出了α-[[角蛋白]]的α-[[螺旋结构]]模型。所以在这阶段对蛋白质[[一级结构]]和空间结构都有了认识。

确定了[[生物]]遗传的物质是[[DNA]]。

虽然1868年F.Miescher就发现了[[核素]]（nuclein），但是在此后的半个多世纪中并未引起重视。20世纪20-30年代已确认了自然界有DNA和[[RNA]]两类[[核酸]]，并阐明了[[核苷酸]]的组成。由于当时对核苷酸和[[碱基]]的定量分析不够精确，得出DNA中A、G、C、T含量是大致相等的结果，因而间长期认为DNA结构只有“四核苷酸”单位的重复，不具有多样性，不能携带更多的信息，当时对携带[[遗传信息]]的侯选分子更多的是考虑蛋白质。40年代以后的实验事实使人们对核酸的功能和结构两方面的认识都有了长足的进步。1944年O.T.Avery等证明了[[肺炎]]球菌转化因子是DNA；1952年S.Furbery等的X-线衍射分析阐明了核苷酸并非平面的空间构像，提出了DNA是螺旋结构；1948-1953年Chargaff等用新的层析和电泳技术分析组成DNA的碱基和核苷酸量，积累了大量的数据，提出了DNA[[碱基组成]]A=T、G=C的Chargaff规则，为碱基酸对的DNA结构认识打下了基础。

== （二）现代分子生物学的建立和发展阶段==

这一阶段是从50年代初到70年代初，以1953年Watson和Crick提出的DNA双螺旋结构模型作为现代分子生物学诞生的里程碑开创了[[分子遗传学]]基本理论建立和发展的黄金。DNA双螺旋发现的最深刻意义在于：确立了核酸作为信息分子的结构基础；提出[[碱基配对]]是核酸复制、遗传信息传递的基本方式；从而最后确定了核酸是遗传的物质基础，为认识核酸与蛋白质的关系及其生命中的作用打下了最重要的基础。在些期间的主要进展包括：

遗传信息传递[[中心法则]]的建立。

在发现DNA双螺旋结构同时，Watson和Crick就提出DNA复制的可能模型。其后在1956年A.Kornbery首先发现DNA[[聚合酶]];1958年Meselson及Stahl[[同位素标记]]和超速离心分离实验为DNA半保留模型提出了证明;1968年Okazaki(冈畸)提出DNA不连续复制模型；1972年证实了DNA复制开始需要RNA作为[[引物]]；70年代初获得DNA[[拓扑异构酶]]，并对[[真核]]DNA聚合酶特性做了分析研究；这些都逐渐完善了对DNA复制机理的认识。

在研究DNA复制将遗传信息传给[[子代]]的同时，提出了RNA在遗传信息传到蛋白质过程中起着中介作用的假说。1958年Weiss及Hurwitz等发现依赖于DNA的RNA聚合酶；1961年Hall和Spiege-lman用RNA-DNA杂增色证明mRNA与DNA序列互补；逐步阐明了RNA[[转录]]合成的机理。

在此同时认识到蛋白质是接受RNA的遗传信息而合成的。50年代初Zamecnik等在形态学和分离的亚[[细胞]]组分实验中已发现[[微粒体]]（microsome）是细胞内[[蛋白质合成]]的部位；1957年Hoagland、Zamecnik及Stephenson[[等分]]离出tRNA并对它们在合成蛋白质中转运氨基酸的功能提出了假设；1961年Brenner及Gross等观察了在蛋白质合成过程中mRNA与[[核糖体]]的结合；1965年Holley首次测出了酵母[[丙氨酸]]tRNA的一级结构；特别是在60年代Nirenberg、Ochoa以及Khorana等几组科学家的共同努力破译了RNA上编码合成蛋白质的[[遗传密码]]，随后研究表明这套遗传密码在生物界具有通用性，从而认识了蛋白质翻译合成的基本过程。

上述重要发现共同建立了以中心法则为基础的分子遗传学基本理论体系。1970年Temin和Baltimore又同时从[[鸡肉瘤病毒]]颗粒中发现以RNA为模板合成DNA的[[反转录酶]]，又进一步补充和完善了遗传信息传递的中心法则。

对蛋白质结构与功能的进一步认识。

1956-58年anfinsen和White根据对[[酶蛋白]]的变性和[[复性]]实验，提出蛋白质的三维空间结构是由其氨基酸序列来确定的。1958年Ingram证明正常的[[血红蛋白]]与镰刀状细胞[[溶血]]症病人的血红蛋白之间，[[亚基]]的肽链上仅有一个[[氨基酸残基]]的差别，使人们对蛋白质一级结构影响功能有了深刻的印象。与此同时，对蛋白质研究的手段也有改进，1969年Weber开始应用SDS-[[聚丙烯酰胺凝胶电泳]]测定蛋白质[[分子量]]；60年代先后分析得血红蛋白、[[核糖核酸酶A]]等一批蛋白质的一级结构；1973年氨基酸序列自动测定仪问世。中国科学家在1965年人工合成了牛胰岛素；在1973年用1.8AX-线衍射分析法测定了牛胰岛素的空间结构,为认识蛋白质的结构做出了重要贡献。

== （三）初步认识生命本质并开始改造生命的深入发展阶段==

70年代后，以[[基因工程]]技术的出现作为新的里程碑，标志着人类涂认识生命本质并能主动改造生命的新时期开始。其间的重大成就包括：

'''1 [[重组DNA]]技术的建立和发展'''

分子生物学理论和技术发展的积累使得基因工程技术的出现成为必然。1967-1970年R.Yuan和H.O.Smith等发现的[[限制性核酸内切酶]]为基因工程提供了有力的工具；1972年Bery等将SV-40[[病毒]]DNA与[[噬菌体]]P22DNA在体外[[重组]]成功，转化[[大肠杆菌]]，使本来在真核功能中合成的蛋白质能在[[细菌]]中合成，打破了种属界限；1977年Boyer等首先将人工合成的[[生长激素释放抑制因子]]14肽的[[基因重组]]入[[质粒]]，成功地在大肠杆菌中合成得到这14肽；1978年Itakura（板仓）等使人[[生长激素]]191肽在大肠杆菌中表达成功；1979年国[[基因]]技术公司用人工合成的[[人胰岛素]]基因重组转入大肠杆菌中合成人胰岛素。至今我国已有[[人干扰素]]、[[人白介素]]2、人[[集落刺激因子]]、重组[[人乙型肝炎]]病毒为[[疫苗]]、基因工程幼畜[[腹泻]]疫苗等多种基因工程药物和疫苗进入生产或临床试用，世界上还有几百种基因工程药物及其它基因工程产品在研制中，成为当今农业和医药业发展的重要方向，将对医学和工农业发展作出新贡献。

转基因动植物和基因剔除植物的成功是基因工程技术发展的结果。1982年Palmiter等将克隆的生长激素基因导入小鼠[[受精卵]][[细胞核]]内，培育得到比原小鼠个体大几倍的”巨鼠“，激起了人们创造优良品家畜的热情。我国水生生物研究所将生长激素基因转入鱼受精卵，得到的转基因鱼的生长显著加快、个体增大；转基因猪也正在研制中。用[[转基因动物]]还能获取治疗人类[[疾病]]的重要蛋白质，导入了[[凝血因子]]IX基因的转基因绵羊分泌的乳汁中含有丰富的凝血因子IX，能有效地用于[[血友病]]的治疗。在[[转基因植物]]方面，1994年能比普通西红柿保鲜时间更长的转基因西红柿投放市场。1996年转基因[[玉米]]、转基因[[大豆]]相继投入商品生产，美国最早研制得到抗虫[[棉花]]，我国科学家将自己发现的[[蛋白酶抑制剂]]基因转入棉花获得抗棉铃虫的棉花株。到1996年全世界已有25万公顷土地种植转基因植物。

[[基因诊断]]与[[基因治疗]]是基因工程在医学领域发展的一个重要方面。1991年国向一患先天性[[免疫缺陷病]]（遗传性[[腺苷]]脱氨酶ADA[[基因缺陷]]）的女孩体内导入重组的ADA基因。获得成功。我国也在1994年用导入[[人凝血因子]]IX基因的方法成功治疗了乙型血友病的患者。在我国用作基因诊断的[[试剂盒]]已有近百种之多。基因诊断和基因治疗正在发展之中。

这时期基因工程的迅速进步得益于许多分子生物学新技术的不断涌现。包括：核酸的化学合成从手工发展到全自动合成。1975-1977年Sanger、Maxam和Gilbert先后发明了三种DNA序列的快速测定法；90年代全自动核酸[[序列测定]]仪的问世；1985年Cetus公司Mullis等发明的[[聚合酶链式反应]]（PCR）的特定核酸序列[[扩增技术]]，更以其高灵敏度和特异性被广泛应用、对分子生物学的发展起到重大的推动作用。

'''2 [[基因组]]研究的发展'''

目前分子生物学已经从研究单个基因发展到研究生物整个基因组的结构与功能。1977年Sanger测定了ΦX174-DNA全部5375个核苷酸的序列；1978年fiers等测出SV-40DNA全部5224对碱基序列；80年代λ噬菌体DNA合部48502[[碱基对]]的序列全部测出；一些小的病毒包括[[乙型肝炎病毒]]、[[艾滋病毒]]等基因组的全序列也陆续被测定；196提底许多科学家共同努力测出了大肠杆菌基因组DNA的全序列长4×106碱基对。测定整个生物基因组核酸的全序列无疑对理解这一生物的生命信息及其功能有极大的意义。1990年[[人类基因组计划]]（HumanGenomeProjiect）开始实施，这是生命科学领域有史以来全球性最庞大的研究计划，将在2005年时测定出人基因组全部DNA3×109碱基对的序列、确定人类约5-10万个基因的一级结构，这将使人类能够更好掌握自己的命运。

'''3 [[单克隆抗体]]及基因工程[[抗体]]的建立和发展'''

1975年Kohler和Milstein首次用B[[淋巴细胞]][[杂交瘤]]技术制备出单克隆以来，人们利用这一[[细胞工程]]技术研制出多种单克隆抗体，为许多疾病的诊断和治疗提供有有效的手段。80年代以后随着基因工程抗体技术相继出现的单域抗体、[[单链]]抗体、[[嵌合抗体]]、重构抗体、双功能抗体等为广泛和有效的应用单克隆抗体提供了广阔的前景。

'''4 [[基因表达]]调控机理'''

分子遗传学基本理论建立者Jacob和Monod最早提出的操纵元学说打开了人类认识基因表达调控的窗口，在分子遗传学基本理论建立的60年代，人们主要认识[[原核生物]]基因表达调控的一些规律，70年代以后才逐渐认识了真核基因组结构和调控的复杂性。1977年最先发现猴SV40病毒和[[腺病毒]]中编码蛋白质的基因序列是不连续的，这种基因内部的[[间隔区]]（[[内含子]]）在真核基因组中是普遍存在的，揭开了认识真核基因组结构和调控的序幕。1981年Cech等发现四膜虫rRNA的自我[[剪接]]，从而发现核（ribozyme）。80-90年代，使人们逐步认识到真核基因的顺式调控元件与反式[[转录因子]]、参与[[蛋白]]南间的[[分子识别]]与相互作用是基因表达调控根本所在。

'''5 细胞信号[[转导]]机理研究成为新的前沿领域'''

细胞信号转导机理的研究可以追述至50年代。Sutherland1957年发现cDNA、1965年提出[[第二信使]]学说，是人们认识[[受体]]介导和细胞信号转导的第一个里程碑。1977年Ross等用重组实验证实G蛋白的存在和功能，将G蛋白与[[腺苷酸环化酶]]的作用相联系起来，深化了对G蛋白偶联信号转导途径的认识。70年代中期以后，[[癌基因]]和[[抑癌基因]]的发现、[[蛋白酪氨酸激酶]]的发现及其结构与功能的深入研究、各种[[受体蛋白]]基历的克隆和结构功能的探索等，使近10年来细胞信号转导的研究更有了长足的进步。目前，对于某些细胞中的一些信号转导途径已经有了初步的认识，尤其是在[[免疫活性细胞]]对抗原的识别及其[[活化]]信号的传递途径方面和细胞[[增殖]]控制方面等形成了一些基本的概念，当然要达到最终目标还需相当长时间的努力。

以上简要介绍了分子生物学的发展过程，可以看到在近半个世纪中它是生命科学范围发展最为迅速的一个前沿领域，推动着整个生命科学的发展。至今分子生物学仍在迅速发展中，新成果、新技术不断涌现，这也从另一方面说明分子生物学发展还处在初级阶段。分子生物学已建立的基本规律给人们认识生命的本质拽出了光明的前景，分子生物学的历史还短，积累的资料还不够，例如：在地球上千姿百态的生物携带庞大的生命信息，迄今人类所了解的只是极少的一部位，还未认识核酸、[[蛋白质组]]成生命的许多基本规律；又如即使到2005年我们已经获得人类基因组DNa 3×109bp的全序列，确定了人的5-10万个基因的一级结构，但是要彻底搞清楚这些[[基因产物]]的功能、调控、基因间的相互关系和协调，要理解80%以上不为蛋白质编码的序列的作用等等，都还要经历漫长的研究道路。可以说分子生物学的发展前景光辉灿烂，道路还会艰难曲折。
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生物化学与分子生物学/分子生物学发展简史 - 版本历史

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