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	<title>基础检验学/血涂片的制备和细胞染色 - 版本历史</title>
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		<title>112.247.109.102：以“{{Hierarchy header}} 血涂片的显微检查是血液细胞学检查的基本方法，临床上应用极为广泛，特别是对于各种血液病的诊...”为内容创建页面</title>
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		<summary type="html">&lt;p&gt;以“{{Hierarchy header}} &lt;a href=&quot;/%E8%A1%80%E6%B6%82%E7%89%87&quot; title=&quot;血涂片&quot;&gt;血涂片&lt;/a&gt;的显微检查是&lt;a href=&quot;/%E8%A1%80%E6%B6%B2&quot; title=&quot;血液&quot;&gt;血液&lt;/a&gt;&lt;a href=&quot;/%E7%BB%86%E8%83%9E%E5%AD%A6&quot; title=&quot;细胞学&quot;&gt;细胞学&lt;/a&gt;检查的基本方法，临床上应用极为广泛，特别是对于各种血液病的诊...”为内容创建页面&lt;/p&gt;
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[[血涂片]]的显微检查是[[血液]][[细胞学]]检查的基本方法，临床上应用极为广泛，特别是对于各种血液病的诊断具有重要的价值，近年来[[血细胞分析]]仪的广泛应用，血涂片的观察也可作为判断仪器结果的简易方法。比台观察10个高倍视野血涂片中[[白细胞]]和[[血小板]]数大致估计血内这些[[细胞]]的数量，借以作为仪器结果分析后[[质控]]的参考。&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
但积压[[涂片]]制备和[[染色]]不良，常使细胞鉴别发生困难，甚至导致错误结论。例如，[[血膜]]过厚细胞重叠缩小，血膜太薄白细胞多集中于边缘，细胞分布不匀；染色偏酸或偏碱均可使细胞染色反应异常。因皮制备厚薄适宜，分布均匀，染色良好的血涂片是血液学检查的重要基本技术之一。&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
血涂片制备方法及注意事项将在实习指导中详细介绍。&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
1．[[瑞特]]（Wright）染色法：为发观察细胞内部结构，识别各种细胞及其异常变化，血涂片必须嘲行染色。血涂片的各种染色方法大多是罗氏染色法衍变来的。目前常用瑞特染色法。&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
（1）瑞特染料是由酸性染料[[伊红]]和碱性染料[[亚甲蓝]]组成有复合染料。亚甲蓝为四甲基[[硫堇]]染料，有对醌型和邻醌型两种结构。通常为氯盐，即氯化[[美蓝]]。美蓝容易氧化为一、二、三甲基硫堇等次级染料。市售美蓝中部分已被氧化为天青。伊红通常为钠盐。即伊红和伊混合后，产生一种憎液性[[胶体]]伊红美蓝中性沉淀，即瑞特染料。&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
（2）细胞的染色既有[[物理]]的吸附作用，又有[[化学]]的亲和作用，各种[[细胞成分]]化学性质不同，对各种染料的亲和力也不一样。因此，用本染料液染色后，在同一血片上，可以看到各种不同的色彩，例如[[血红蛋白]]，嗜酸性颗粒为[[碱性蛋白质]]，与酸性染料伊红结果，染粉红色，称为嗜酸性物质；[[细胞核]][[蛋白]]和[[淋巴细胞]]胞浆为酸性，与碱性染料美蓝或天青结合，染紫蓝色，称为[[嗜碱性]]物质；中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合，染淡紫色，称为中性物质。&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
（3）PH对细胞染色有影响。细胞各种成分均不[[蛋白质]]，由于蛋白质系[[两性电解质]]，所带电荷随溶液PH而定，在偏酸性环境中下在电荷增多，易与伊红结合，染色偏红；在偏三性环境中负电荷增多，易与美蓝或天青结合，染色偏蓝。因此细胞染色对氢离子浓度十分敏感，染色用正经片必须清洁，无酸碱污染。配制顼特液必须用优质[[甲醇]]，稀释染色必须用[[缓冲液]]，冲洗用水应近中性，否则可导致各种细胞染色反应异常，以致识别困难，甚至造成错误。&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
新鲜配制的染料偏碱，须在室温或是37℃下贮存一定时间，待染料成熟，主要是美蓝逐渐转变为天青B后才能使用，贮存时愈久，染色效果愈好。EAm GILLILAND等采用吸光度比值作为顼特染液的质量规格。rA测定方法如下：取瑞特染液15-25μl（视染液浓度而定），加甲醇10ml稀释，混匀后以甲醇为空折管，分别以波长650nm和25nm比色。Ra=a650/a525.因为美蓝吸收峰小组长为650nm，伊红吸收峰波长为525nm ;天青B吸收峰也为650nm但吸光度A约为美蓝的一半。所以新配染料rA接近2，随着美蓝逐渐氧化为天青B，RA也相应下降。RA下降到1.3±0.1时即可使用。瑞特染液贮存过程中，必须塞严，以防止甲醇[[挥发]]和被氧化成甲酸。有人主张在配方中加入[[甘油]]30ml，防止甲醇挥发，关可合细胞染色清晰。甲醇必须纯净，如甲醇中[[丙酮]]含量过多，染色偏酸，使白细胞着色不良。&lt;br /&gt;
&lt;br /&gt;
2．吉姆萨（Giemsa）染色法：吉姆萨染液由天青，伊红组成。染色原理和结果与瑞特染色法基本相同。但本法对细胞核和[[寄生虫]]着色较好，结构显示更不清晰，而[[胞质]]和中性颗粒则着色较差。为兼顾二者之长，可用复合染色法。即以稀释吉姆萨液代替缓冲液，按瑞特染色法染10min。或先用瑞特染色法染色后，再用稀释吉姆萨[[复染]]。&lt;br /&gt;
{{Hierarchy footer}}&lt;br /&gt;
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