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2014-02-05T14:07:40Z

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（一）特异性高：首次报导的PCR所用的[[DNA]][[聚合酶]]是[[大肠杆菌]]的DNAPolymeraseI的Klenow大片段，其[[酶活性]]在90℃会变性[[失活]]，需每次PCR循环都要重新加入Klenow大片段，同时[[引物]]是在37℃延伸（聚合）易产生模板—引物之间的[[碱基]]错配、致特异性较差，1988年Saiki等从[[温泉]]水中分离到的水生嗜热[[杆菌]]中提取的热稳定的Taq DNA聚合酶，在[[热变性]]处理时不被[[灭活]]，不必在每次循环[[扩增]]中再加入新酶，可以在较高温度下连续反应，显着地提高PCR产物的特异性，序列分析证明其扩增的DNA序列与原模板DNA一致。扩增过程中，[[单核苷酸]]的错误参入程度很低、其错配率一般只有约万分之一，足可以提供特异性分析，选用各型[[病毒]]相对的特异[[寡核苷酸]]引物。PCR能一次确定病毒的多重[[感染]]。如用HPV11和HPV16型病毒引物检测病妇[[宫颈刮片]][[细胞]]可以发现部分病人存在HPV11和HPV16两型的双重感染。

（二）高度敏感：理论上PCR可以按2n倍数扩增DNA十亿倍以上，实际应用已证实可以将极微量的靶DNA成百万倍以上地扩增到足够检测分析量的DNA。能从100万个细胞中检出一个[[靶细胞]]，或对诸如病人口液等只含一个感染细胞的[[标本]]或仅含0.01pg的感染细胞的特异性片段样品中均可检测。

（三）快速及无[[放射性]]：一般在2小时内约可完成30次以上的循环扩增，加上用电泳分析。只需3-4小时便可完成，不用分离提纯病毒，DNA粗制品及总[[RNA]]均可作为反应[[起始物]]，可直接用临床标本如[[血液]]、体液、尿液、洗液、脱落[[毛发]]、细胞、活体组织等粗制的DNA的提取液来扩增检测，省去费时繁杂的提纯程序，扩增产物用一般电泳分析即可，不一定用[[同位素]]，无放射性易于推广。

（四）简便：扩增产物可直接供作序列分析和[[分子克隆]]，摆脱繁琐的[[基因]]方法，可直接从RNA或[[染色体]]DNA中或部分DNA已降解的样品中分离目的基因，省去常规方法中须先进行克隆后再作序列分析的冗繁程序。已固定的和包埋的组织或切片亦可检测。如在PCR引物端事先构建一个[[内切酶]][[位点]]，扩增的靶DNA可直接克隆到M13，PUC19等相应[[酶切位点]]的载体中。

（五）可扩增RNA或cDNA：先按通常方法用寡脱氧[[胸苷]]引物和[[逆转录酶]]将mRNA转变成单链cDNA，再将得到的[[单链]]cDNA进行PCR扩增，即使mRNA[[转录]]片段只有100ngcDNA中的0.01%，也能经PCR扩增1ng有242[[碱基对]]长度的特异片段，有些[[外显子]]分散在一段很长的DNA中，难以将整段DNA大分子扩增和做序列分析。若以mRNA作模板，则可将外显子集中，用PCR一次便完成对外显子的扩增并进行序列分析。
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