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临床生物化学/层析技术的原理和分类 - 版本历史
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（一）层析技术的原理<br />
<br />
层[[析法]]是目前广泛应用的一种分离技术。本世纪初俄国植物学家M.Tswett发现并使用这一技术证明了植物的叶子中不仅有[[叶绿素]]还含有其它色素。现在层析法已成为生物化学、[[分子]][[生物学]]及其它学科领域有效的分离分析工具之一。<br />
<br />
层析法是利用不同物质理化性质的差异而建立起来的技术。所有的层析系统都由两个相组成：一是固定相，它或者是固体物质或者是固定于固体物质上的成分；另一是流动相，即可以流动的物质，如水和各种溶媒。当待分离的混合物随溶媒（流动相）通过固定相时，由于各组份的理化性质存在差异，与两相发生相互作用（吸附、溶解、结合等）的能力不同，在两相中的分配（含量对比）不同，而且随溶媒向前移动，各组份不断地在两相中进行再分配。与固定相相互作用力越弱的组份，随流动相移动时受到的阻滞作用小，向前移动的速度快。反之，与固定相相互作用越强的组份，向前移动速度越慢。分部收集流出液，可得到样品中所含的各单一组份，从而达到将各组份分离的目的。<br />
<br />
（二）层析法分类见表16-5～7<br />
<br />
（三）层析法的特点与应用<br />
<br />
表16-5 按两相所处状态分类<br />
<br />
{| class="wikitable"<br />
| rowspan="2" colspan="2" |<br />
| colspan="2" | 流动相<br />
|-<br />
| 液体<br />
| 气体<br />
|-<br />
|<br />
| 液体<br />
| 液-液层析法<br />
| 气-液层析法<br />
|-<br />
| 固定相<br />
| colspan="3" |<br />
|-<br />
|<br />
| 固体<br />
| 液-固层析法<br />
| 气-固层析法<br />
|}<br />
<br />
层析法是根据物质的理化性质不同而建立的分离分析方法。根据层析峰的位置及峰高或峰面积，可以定性及定量。层析法与光学、电学或[[电化学]]仪器连用，可检测出层析后各组份的浓度或质量，同时绘出层析图。层析仪与电子计算机联用，可使操作及数据处理自动化，大大缩短分析时间。由于层析法具有分辨率高、灵敏度高、选择性好、速度快等特点，因此适用于杂质多、含量少的复杂样品分析，尤其适用于[[生物]]样品的分离分析。近年来，已成为生物化学及分子生物学常用的分析方法。在医药卫生、环境[[化学]]、高分子材料、石油化工等方面也得到了广泛的应用。<br />
<br />
表16-6 按层析原理分类<br />
<br />
{| class="wikitable"<br />
| 名称<br />
| 分离原理<br />
|-<br />
| [[吸附层析]]法<br />
| 组份在[[吸附剂]]表面吸附固定相是固体吸附剂，各能力不同<br />
|-<br />
| 分配层析法<br />
| 各组份在流动相和静止液相（固相）中的分配系数不同<br />
|-<br />
| 离子交换层析法<br />
| 固定相是离子交换剂，各组份与离子交换剂亲和力不同<br />
|-<br />
| [[凝胶层析]]法<br />
| 固定相是多孔[[凝胶]]，各组份的分子大小不同，因而在凝胶上受阻滞的程度不同<br />
|-<br />
| 亲和层析法<br />
| 固定相只能与一种待分离组份专一结合，以此和无亲和力的其它组份分离<br />
|}<br />
<br />
表16-7 按操作形式不同分类<br />
<br />
{| class="wikitable"<br />
| 名称<br />
| 操作形式<br />
|-<br />
| [[柱层析]]法<br />
| 固定相装于柱内，使样品沿着一个向前移而达分离<br />
|-<br />
| [[薄层层析法]]<br />
| 将适当粘度的固定相均匀涂铺在薄板上，点样后用流动相展开，使各组份分离<br />
|-<br />
| 纸层析法<br />
| 用滤纸作液体的载体，点样后用流动相展开，使各组份分离<br />
|-<br />
| 薄膜层析法<br />
| 将适当的高分子有机吸附剂制成薄膜，以类似纸层析方法进行物质的分离<br />
|}<br />
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